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SH-SY5Y的培養(yǎng)

更新時(shí)間:2021-05-24  |  點(diǎn)擊率:1722

       將*培養(yǎng)基吸出保存在4℃環(huán)境下,培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)留有5ml供細(xì)胞生長(zhǎng)。經(jīng)觀察,SY5Y的密度在80%左右,放至二氧化碳培養(yǎng)箱(37℃,5%二氧化碳)培養(yǎng)。

       使用含有EDTA的胰酶消化進(jìn)行1:3傳代,約30S細(xì)胞成塊脫落,這說明消化過度。含有EDTA的胰酶消化能力強(qiáng),下次傳代應(yīng)注意縮短消化時(shí)間。消化過度,細(xì)胞成塊脫落,不易吹散。

       傳代后,成團(tuán)的細(xì)胞不利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的獲取和代謝廢物的排出,嚴(yán)重影響增殖,甚至導(dǎo)致凋亡。下午5時(shí)觀察,細(xì)胞均已鋪開貼壁,密度較大,狀態(tài)良好。為保險(xiǎn)起見,在最初的培養(yǎng)中,使用的培養(yǎng)是*培養(yǎng)液。使用完畢后,得自己配:1640+15%滅活FBS+1%雙抗+1%谷氨酰胺。將FBS在二氧化碳培養(yǎng)箱放置35分鐘進(jìn)行滅活。本來FBS凍存的,需在室溫下恢復(fù)室溫,方可放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中。將泡酸的玻璃培養(yǎng)瓶、滴管、200ml玻璃瓶和尖底玻璃離心管清洗并高壓后風(fēng)干。

 

       介紹下SH-SY5Y:中文名稱人神經(jīng)細(xì)胞母細(xì)胞瘤細(xì)胞,該細(xì)胞分化低、繁殖快、細(xì)胞形態(tài)、生理和生化功能與正常神經(jīng)細(xì)胞相似。被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制研究和藥物作用機(jī)制方面的研究

       [1]。該細(xì)胞可以產(chǎn)生兒茶酚胺和多巴胺,磁刺激的頻率和時(shí)間顯著影響兒茶酚胺的代謝!而兒茶酚胺與抑郁癥有關(guān),因此,有人對(duì)體外培養(yǎng)的SH-SY5Y施加rTMS,探究rTMS可能存在的對(duì)抑郁癥的影響

       [2]。該細(xì)胞還可以表達(dá)淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protern)和β淀粉樣蛋白(β-amyloid )

       [3]。這個(gè)兩種蛋白與AD的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。

 

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